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ELISA試劑盒實(shí)用小竅門,值得看看!

日期:2025-07-12 18:23
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摘要:ELISA試劑盒實(shí)用小竅門,值得看看!

ELISA試劑盒實(shí)用小竅門,值得看看!

1. 標(biāo)本及收集、貯運(yùn)要素
① 嚴(yán)峻溶血:以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色構(gòu)成假陽性;
② 混有紅細(xì)胞的血清易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈
③ 如有**污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)生假陽性反響;
④ 標(biāo)本凝結(jié)不全,有時為了爭取時刻快速檢測,常在血液還未開端凝結(jié)時即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊,易構(gòu)成假陽性成果;
⑤ 采血試管洗刷不完全、重復(fù)運(yùn)用易穿插污染
⑥ 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性。
血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時刻過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻并避免發(fā)生氣泡。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。重復(fù)凍融會使 抗體 效價(jià)下跌,所以測 抗體 的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測,宜少數(shù)分裝冰存。
 2. 之操作技術(shù)的影響
① 應(yīng)確保清潔,整個操作過程中確保酶標(biāo)板不觸摸次氯酸。以上的辦法可以使“花板”降至限度。然后提高檢測的特異性。并得到更**、可靠的試驗(yàn)成果。
② 合理安排檢丈量,避免反響板過多構(gòu)成洗板等候時刻長。
③ 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。
④ 用洗板機(jī)洗板時,確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要避免針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易發(fā)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的呈現(xiàn)。
⑤ 顯色劑盡量在臨用前制造,堅(jiān)持不必過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不必。
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